分光光度法测定食品中山梨酸含量

摘要：【目的】建立分光光度法测定食品中的山梨酸含量的方法【方法】以硫酸-重铬酸钾溶液为山梨酸氧化体系，氧化产物丙二醛进一步与硫代巴比妥酸进行显色反应。在吸收波长530nm处测定吸光度。【结果】山梨酸浓度在0～1.066μg/ml范围内呈线性相关，线性范围内吸光度与山梨酸浓度(μg/ml)间的关系为：A=0.3715c+0.0047，R2=0.9998，回收率为99.0%～101.1%。【结论】该方法具有操作简单、准确度和精密度高，适合于食品中山梨酸钾含量的测定。

关键词：分光光度法 硫酸-重铬酸钾 硫代巴比妥酸 山梨酸

引言

山梨酸俗名花楸酸，化学名称为2，4-已二烯酸。山梨酸及其钾盐是一种的食品防腐剂，在我国可用于酱油、果酱类、酱菜类、罐头类和一些酒类等食品中。山梨酸是一种国际公认安全(GRAS)的防腐剂，安全性很高，日允许量为25mg/Kg。但是如果食品中添加的山梨酸超标严重，消费者长期服用，在一定程度上会抑制骨骼生长，危害肾、肝脏的健康[1]。我国《食品添加剂使用卫生标准》(GB2760-1996)中规定使用量： 酱菜、果汁、蜜饯、果冻：≤0.5;酱油、果酱、软糖、面包：≤0.1。食品中山梨酸的测定方法有可见分光光度法、紫外分光光度法、气相色谱法和高效液相色谱法，本文采用分光光度法测定，测定含有山梨酸防腐剂的酱油、果汁、酱菜三种产品。

提取样品中山梨酸及其盐类，经硫酸-重铬酸钾氧化成丙二醛，再与硫代巴比妥酸形成红色化合物，其颜色深浅与丙二醛含量成正比，于530nm波长处比色定量[2]。

一、材料与方法

1、仪器与试剂

仪器：722E型分光光度计、组织捣碎机、水浴锅、比色管

试剂：①重铬酸钾-硫酸溶液 1/60mol/L重铬酸钾与0.15mol/L硫酸以1：1混合②5g/L硫代巴比妥酸溶液：称取0.50g硫代巴比妥酸溶于20mL蒸馏水中，加1.0mol/L NaOH溶液10mL，使之完全溶解以后，加1.0mol/L HCl溶液1lmL，用蒸馏水稀释至100mL，摇匀。③山梨酸钾标准液(1000mg/L)：准确称取山梨酸钾0.2500g于100mL烧杯中，用蒸馏水溶解后，移入250mL容量瓶中，定容至刻度。

2、原理

提取样品中山梨酸及其盐类，经硫酸-重铬酸钾氧化成丙二醛，再与硫代巴比妥酸形成红色化合物，其颜色深浅与丙二醛含量成正比，于530nm波长处比色定量。

3、操作方法

3.1样品处理 称取100g样品，加200ml水于组织捣碎机中捣成匀浆。称取匀浆100g，，加水200ml继续捣1min，称取10g于250ml容量瓶中，用水定容，摇匀，过滤备用。

3.2试样测定 吸取试样处理液2ml于10ml比色管中，加入2.0mL重铬酸钾-硫酸溶液，摇匀后至100℃水浴中加热7min，冷水流冷却后加5g/L硫代巴比妥酸溶液2.0mL，摇匀，继续加热10min，冷却后用蒸馏水稀释至刻度，以试剂空白作参比，采用1cm比色皿，于530nm波长处测定溶液的吸光度。

二、结果与分析

1、建立标准曲线

准确吸取1000mg/L山梨酸钾标准液0.0ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8 ml、1.0ml、1.2 ml、1.4ml于100mL容量瓶中用水定容。分别吸取1.0ml于相应10ml比色管中，按样品测定方法操作，绘制工作曲线。

表1 山梨酸钾标准溶液的`工作曲线数据

标准工作曲线的线性回归方程如下：A=0.3715c+0.0047，相关系数R2=0.9998。由表1数据可知，测定山梨酸钾的线性关系好，精密度较高。

2、准确度及精密度实验

按1中的样品溶液的制备和测定方法，对拟含山梨酸防腐剂的样品(自制山梨酸钾添加量分别为0.302、0.501mg/g的苹果泥)进行了精密度实验，同一样品测定6次，测定结果见表2。

表2 准确度及精密度实验

由上表可得，相对标准偏差较小，回收率在99.01～99.80，方法准确度高。相对标准偏差在0.620～0.957之间，精密度较高。

3、样品分析

称取购自某超市的标称含有山梨酸防腐剂的油酱、苹果汁、酱菜三种产品，按1中样品溶液的制备和测定方法，分别测定上述三种样品中山梨酸的含量，测定结果见表3

表3 样品测定

从表3可以看出，酱油中的山梨酸含量超标，苹果汁、酱菜中的山梨酸含量合格，相对标准偏差在0.30～0.54之间，方法准确可靠。

三、结论

通过实验证实， 分光光度法测定食品中的山梨酸含量，该测定方法值得信赖，且该方法具有快速方便、灵敏度高、使用仪器简单等特点。

参考文献：

[1] 谢全彪.分光光度法同时测定食品中的抗坏血酸和山梨酸[J].分析化学，1997，25(2)：247。

[2]唐突，陈剑虹.食品卫生检测技术[M].1版.北京：化学工业出版社.2006.