微生物的检验培训总结
1. “菌株的传代次数不得超过5代”表示菌株传代只能传递到第四代,使用第四代时意味着菌株已经是第五代,因此,传代记录中不能显示传5代。
2. 标准菌株确认工作是否齐全:存活性确认,纯度确认,菌落形态、染色镜检及生化反应进行确认。
3. 菌种保藏所用的冰箱是否经过确认,是否容易结霜,且保存菌种(尤其是特异菌株)是否采用两种以上的方式,防止意外流失。
4. 培养基的适用性检查:
微生物限度检查中培养基适用性检查:在注重回收率达到70%时,是否确保检查用培养基上的菌落形态同对照培养基上一致。
控制菌检查中培养基适用性检查:促生长能力----最短培养时间内长出相应的菌落;抑制能力-----最长培养时间下不得有菌生长;细菌培养时间:18-24-48小时;真菌培养时间:24-48-72小时,促生长取最短时间,抑制取最长时间。因此供试品在检查时,培养时间应取最长时间。
环境监测的培养基适用性检查:“中国药典附录:药品微生物实验室规范指导原则”中规定:用于环境监测的培养基须特别防护,最好是双层包装和终端灭菌。如果不能采用终端灭菌的培养基,在使用前应进行100%的预培养避免假阳性出现。同时做促生长试验,防止假阴性出现。
沉降菌监测所用培养基的适用性检查:
①培养基回收率确认(同微生物限度检查的培养基适用性检查);
②确认培养基放置最长时间,在标准风速下,一般不宜超过2小时;
③同时确认温度、湿度及风速对培养基放置的影响。
5. 洁净区微生物监控标准的理解是否到位?如何计算平均值。
6. 生产抗生素的洁净区进行环境监测,其培养基是否添加有中和剂,如亚硫酸氢钠、聚山梨酯等。
7. 洁净室是否使用消毒剂与杀孢子轮滑使用,杀孢子剂一般半月1次(建议)
8. 无菌检查:
在结果进行观察时,最好将集菌器置于黑白背景下观察,确保不能因灯检原因而出现假阴性。 无菌检查结果判断:
集菌器出现浑浊,但证明不是微生物,判供试品符合规定;
以下情况可证明无菌检查结果无效:设备及环境微生物监控结果不符合规定;回顾无菌试验过程,发现有可能引起微生物污染的因素(阴性对照失败、培养基的.灵敏度试验失败等);供试管中生长的微生物经鉴定后确认是物品或无菌操作技术所引起。此时可以提出复验申请,复验取样条件: ①尽可能使用原样品(全检量的2-3倍)
②尽可能使用与第一份来源相同的另一份样品(如理化检验样品)
③尽可能在同一处重新取样
9. 超净工作台及生物安全柜中不能使用酒精灯:酒精灯的使用会导致局部温度对流,在生物安全柜中则会造成洁净气流紊乱,从而将台面污染的灰尘或者周围污染的空气带入到无菌操作区,从而污染样品;另外超净工作台中放置酒精灯,洁净风是超外吹的,对流空气中污染的菌可能对操作人员造成伤害。
10. 实验室进行调查:一般将重分析、重检验、重取样同时进行,可以节省调查时间,延缓车间库存时间。
11. 制药用水中生物膜(生物膜形成微生物生长的物理和化学屏障。不仅增加了微生物对热、各种药物、杀菌刺、去污剂和清洁剂的抗性;而且,有利于微生物捕获营养物质。加速生长繁殖。)出现的可能现象:①在同一或同几个监测点多次检测均出现菌落;②菌落的种类多样,形态多样;
措施:采用大量冲洗、化学消毒如次氯酸钠、二氧化氯等其他办法。
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